BACTERIOLOGÍA (Micro)

 Algunos microorganismos que podemos encontrar en el tracto digestivo

- Salmonella spp.→ Son bacilos gram negativos, oxidasa negativos, anaerobios facultativos, ampliamente distribuidos en diferentes ambientes.

La infección por salmonela (salmonelosis) es una enfermedad bacteriana común que afecta el tubo intestinal. La bacteria de la salmonela generalmente vive en los intestinos de animales y humanos y se expulsa mediante las heces. La forma más frecuente de infección en los humanos es a través de agua o alimentos contaminados.

Algunas personas con infección por salmonela no tienen síntomas. Una gran parte presenta diarrea, fiebre y calambres abdominales (estomacales) dentro de las 8 a 72 horas siguientes a la exposición. La mayoría de las personas sanas se recupera en unos pocos días o una semana sin tratamiento específico.

En  el caso del joven, podríamos encontrarnos con este microorganismo ya que, se sospecha de intoxicación alimentaria o enfermedades intestinales y además el paciente tiene síntomas como, diarrea y fiebre. 

- Shigella sp. →  Shigella es un género bacteriano perteneciente a la familia Enterobacteriaceae constituido por bacilos gramnegativos inmóviles, no formadoras de esporas e incapaces de fermentar la lactosa.
El principal signo de infección por Shigella es la diarrea, que suele tener sangre.
La Shigella es muy contagiosa. Las personas se infectan con Shigella cuando entran en contacto e ingieren pequeñas cantidades de bacterias de las heces de una persona infectada. Por ejemplo, puede suceder en centros de cuidado infantil cuando el personal no se lava bien las manos después de cambiar los pañales o enseñar a los niños de uno a dos años a usar el baño. La bacteria Shigella también se puede transmitir a través de alimentos infectados o al beber o nadar en agua no potable.

-Ya que el joven de nuestro caso presenta diarrea con sangre, podríamos sospechar de este microorganismo. 

- Yersinia sp. → El género Yersinia son bacterias Gram negativas, ubicuas, que están ampliamente distribuidas en la naturaleza, pudiendo producir infecciones tanto en animales como en el ser humano, a través del consumo de alimentos o aguas contaminadas.

Aunque la infección por este microorganismo no es muy común, la yersiniosis es una enfermedad bacteriana que generalmente afecta el tracto intestinal. Es una enfermedad relativamente rara y generalmente se presenta como un hecho individual aislado. Este germen se contagia a través del consumo de alimentos o agua contaminados y por el contacto con personas o animales infectados.

Las personas infectadas pueden presentar diarrea leve o severa, fiebre y calambres abdominales. En algunas ocasiones, la infección por yersinia puede ser similar a la apendicitis.

-Aunque como hemos mencionado anteriormente, la infección por este microorganismo sea poco común, deberemos tenerlo en cuenta ya que algunos de los síntomas que presenta el paciente (fiebre y diarrea) coinciden con los que genera este microorganismo, aunque el paciente no declara calambres abdominales. En cualquier caso, se sospecha de intoxicación alimentaria. 

 

- Campylobacter sp.→ Pertenece al grupo de bacterias gram negativas, no formadoras de esporas y, al microscopio, se observan como delgados filamentos espirales curvos y con flagelos polares, con un tamaño que va de 0,2 µm a 0,8 µm de ancho y 0,5 a 5 µm de largo. 

La infección por Campylobacter es una enfermedad transmitida por alimentos. Se puede contraer cuando se consumen alimentos contaminados, en especial aves que no están bien cocidas o crudas.  Sin embargo, también se puede contraer al tomar agua contaminada o leche cruda, o manipular excrementos de animales.

Algunas personas infectadas no tienen ningún síntoma. En caso de tener síntomas, suelen aparecer de dos a cinco días después de la infección y suelen durar una semana. Los síntomas más comunes son; diarrea, que puede ser con sangre, calambres, dolor abdominal, fiebre, fatiga y náusea y vómitos. 

-En este caso también los síntomas de diarrea con sangre y fiebre, coinciden con los síntomas de nuestro paciente por lo que habrá que tener en cuenta este microorganismo a la hora del análisis. No obstante, hay otros síntomas como la fatiga, náuseas, vómitos y dolor abdominal que el paciente no refiere. 

- Escherichia coli →Se caracteriza por poseer bacilos Gram negativos, no esporulante, producción de indol a partir de triptófano, no utilización de citrato como fuente de carbono y no producción de acetoína. Además, fermenta la glucosa y la lactosa con producción de gas.

La mayoría de las E. coli no causan problemas. Pero, algunos tipos pueden producir enfermedades y causar diarrea. Uno de ellos causa la diarrea del viajero. El peor tipo de E. coli causa una diarrea hemorrágica y a veces puede causar insuficiencia renal y hasta la muerte. Esto, en general, ocurre en niños y en adultos con sistemas inmunitarios debilitados.

Se pueden adquirir infecciones por E. coli al consumir alimentos que contienen la bacteria. Los síntomas pueden incluir: Náuseas o vómitos, fuertes cólicos abdominales, diarrea líquida o con mucha sangre, cansancio y fiebre. 

-Este microorganismo suele ser bastante común en estos casos, y ya que los síntomas como diarrea y fiebre coinciden con los síntomas de nuestro paciente, E. coli es un microorganismo que tendremos que tener muy presente en nuestro análisis, sobretodo porque es un microorganismo bastante común en casos de cntaminación alimentaria.

- Bacillus cereus. → Se trata de un bacilo Gram positivo, esporulado, anaerobio facultativo y móvil. Causa intoxicaciones alimentarias a través de la ingesta de alimentos contaminados. 

Bacillus cereus es una bacteria, que puede contaminar los alimentos y que en sus consumidores produce dos tipos de intoxicaciones alimentarias: la forma diarreica y la forma entérica.

La forma diarreica es producida por una toxina termolábil que ocasiona diarrea y dolor abdominal. Entre otros alimentos puede encontrarse en algunos derivados cárnicos, sopas deshidratadas, especias y salsas vegetales. La forma emética, consecuencia de una toxina termoestable, se manifiesta por vómitos y náuseas y se relaciona principalmente con el consumo de arroz o pasta contaminados.

-En nuestro caso, esta bacteria podría estar presente en la forma diarreica ya que nuestro paciente presenta diarrea y no náuseas. 

COPROCULTIVO

¿Qué es un coprocultivo?

A modo de introducción, un coprocultivo es un análisis que se realiza en el laboratorio para detectar la presencia de bacterias, parásitos u otros microorganismos patógenos en las heces fecales.

¿Cuál es el objetivo de realizar este coprocultivo?

− Comprobar mediante coprocultivo la presencia en las heces de los microorganismos cultivables más frecuentes (Salmonella, Shigella y Yersinia) que puedan ser responsables de un proceso infeccioso

− Diferenciar los microorganismos patógenos de los componentes de la microbiota fecal normal

− Identificar mediante pruebas bioquímicas los posibles microorganismos patógenos.

Crecimientos en los medios de cultivo: 

Hemos utilizado los medios de cultivo de acuerdo a la hipótesis de cada uno de los casos, ya que cada medio contiene el crecimiento de los microorganismos de sospecha.

1. AGAR MACCONKEY

Es un medio selectivo y diferencial para aerobios facultativos. Diferencia bacilos Gram negativos a partir de muestras clínicas de aguas y alimentos y todas las familias de Enterobacteriacae y fermentadores de la lactosa o no fermentadores de lactosa. 

Las peptonas aportan los nutrientes para el desarrollo bacteriano, la lactosa es el hidrato de carbono fermentable, la mezcla de sales biliares y el cristal violeta son los agentes selectivos que inhiben el desarrollo de gran parte de la microbiota Gram positiva para permitir el aislamiento de bacterias Gram negativas, el agar es el agente solidificante y las bacterias entéricas tienen la habilidad de fermentar lactosa, que son detectadas utilizando el carbohidrato lactosa y el indicador de pH rojo neutro.

Hemos usado este medio, ya que aunque en un principio no sospechábamos de E. coli, es una bacteria muy común en este tipo de enfermedades gastrointestinales. En este medio, las colonias de E. coli aparecen de un color rosado-rojizo y las colonias de Salmonella y Shigella podría crecer también en este medio, sin embargo las colonias serían incoloras. 

Resultados y conclusiones: 

En nuestro caso, las colonias que nos han crecido en agar MacConkey son de color rosa-rojas, por lo que sospechamos de le presencia de E.coli, ya que a pesar de que los demás microorganismos puedan crecer, las colonias serían incoloras. 

2. AGAR HEKTOEN: Hemos utilizado este medio de cultivo ya que es un medio selectivo y diferencial utilizado para el aislamiento de Salmonella spp. y Shigella spp. a partir de heces y alimentos. Contiene indicadores de fermentación de lactosa y producción ácido sulfhídrico, así como inhibidores que previenen el crecimiento de bacterias grampositivas

Se incuba en aerobiosis, a 33-37ºC durante 18 a 24 horas. Se logra una mejor diferenciación entre especies de Salmonella y Shigella al incubar las placas durante 48 horas

Resultados y conclusiones: 

En nuestra placa nos ha salido colonias de color negro, por lo que sospechamos de Salmonella; ya que las colonias de este microorganismo se ven de color verde azuladas con o sin centro negro. 

3. AGAR SANGRE: Hemos utilizado este medio ya que es un medio muy rico que permite el crecimiento de todos los microorganismos con importancia clínica que permite recuperar los patógenos (Enterobacterias, Estafilococos, Enterococos) habituales y también microorganismos más exigentes que no crecerán (Streptococos) o crecerían con dificultad selectivos y diferenciales.

Se utiliza también para ver la capacidad hemolítica de los microorganismos patógenos actúan sobre los glóbulos rojos.

Resultados y conclusiones: 

Nos han salido colonias sin halo, lisas y de color grisáceo,  por lo que se trata de hemolisis gamma (no hemolisis). En este caso, podríamos sospechar tanto de E. coli como de Salmonella, ya que ninguno de estos microorganismos produce hemolisis, sin embargo, nos vamos a centrar más en Salmonella, ya que las colonias de este microorganismo tienden a ser más opacas, grisáceas y lisas, mientras que las de E. coli suelen ser más rugosas y translucidas. 

4. AGAR SALMONELLA - SHIGELLA: Hemos utilizado este medio ya que es un medio de cultivo selectivo y diferencial utilizado para el aislamiento de Salmonella spp. y de algunas especies de Shigella spp. a partir de heces, alimentos y otros materiales en los cuales se sospeche su presencia.

Resultados y conclusiones: 

Nos han salido colonias de color negro, estas colonias suelen ser características de Salmonella, ya que la formación de estas colonias indican la presencia de bacterias que producen sulfuro de hidrógeno. Sin embargo, habrá que confirmar nuestra sospecha con algunas pruebas bioquímicas ya que puede haber otras bacterias que produzcan sulfuro de hidrógeno. 

5. CALDO DE TETRATIONATO: Hemos utilizado este medio ya que es un  medio de cultivo utilizado para el enriquecimiento selectivo de Salmonella spp. a partir de heces, alimentos y otros materiales de importancia sanitaria. 

Resultados y conclusiones: 

Nos han salido colonias negras. Al sembrar este caldo en agar SS, el medio permite el crecimiento selectivo de Salmonella, mientras que inhibe el crecimiento de otras bacterias que no sean Salmonella o Shigella. En este caso, la formación de colonias negras, refuerza la posibilidad de que las bacterias presentes en la muestra sean Salmonella. 

TINCIONES: 

A partir de las placas de Agar MacConkey, Agar Hektoen y  Agar SS. (de la resiembra del Caldo de Tetrationato) realizamos las tinciones en las que en todos los casos observamos bacilos gramnegativos. Esta morfología es característica de todos los m.o. de los que sospechamos,  a excepción de la Yersinia que son cocobacilos, y por eso la descartamos de nuestra hipótesis una vez realizada la tinción. Para poder diferenciar cual de estas bacterias tenemos en la muestra, realizamos varias pruebas bioquímicas.  

Resultados: 

-Agar Hektoen

- Agar SS. 

-Caldo en Agar SS.

-Agar MacConkey

PRUEBAS BIOQUÍMICAS

Para confirmar la presencia de los microorganismos ( E. coli, Salmonella y Shigella) de los que sospechamos, hemos realizado varias pruebas bioquímicas. Las pruebas que hemos realizado han sido; catalasa, oxidasa, ureasa y KIA. 

CATALASA: 

La prueba de catalasa se utiliza para determinar la capacidad de un organismo para descomponer el peróxido de hidrógeno, lo que puede proporcionar información sobre su metabolismo. Esta prueba es positiva (presencia de burbujas) en el caso de todos los microorganismos de los que tenemos sospecha, por eso realizamos esta prueba, para asegurarnos de que estas sospechas son correctas, sin embargo, con esta prueba, no podemos descartar aún ninguna bacteria.

Resultados y conclusiones: 

OXIDASA: 

La prueba de oxidasa se utiliza para determinar la presencia de la enzima citocromo oxidasa en bacterias, especialmente en muchas bacterias Gram negativas que la mayoría son positivas. Sin embargo, hay excepciones, por lo que esta prueba generalmente se utiliza en combinación con otras pruebas de identificación para confirmar la identidad bacteriana.

Hemos utilizado esta prueba, ya que es negativa para E. coli, Yersinia y Salmonella, y positiva para Shigella. 

Resultados y conclusiones: 

Los resultados de esta prueba, han sido todos negativos, por lo que podríamos descartar Shigella  ya que es oxidasa positivas. 

UREASA: 

Esta prueba se basa en la capacidad de la ureasa para descomponer la urea en amoníaco y dióxido de carbono. Salmonella y Shigella son bacterias que generalmente son negativas para la prueba de ureasa. Estas bacterias no producen ureasa. Sin embargo, Yersinia es ureasa positiva. 

Resultados y conclusiones:

Nuestro resultado, a sido negativo, ya que el medio no ha cambiado de color,  en este caso, podríamos descartar Yersinia, ya que como hemos mencionado sería ureasa positiva. Por lo que después de realizar esta prueba, nos quedaríamos con la sospecha de E. coli y Salmonella.

KIA:

Esta prueba la utilizamos para la diferenciación de enterobacterias, en base a la fermentación de hidratos de carbono y a la producción de ácido sulfhídrico. En caso de tener E. coli el medio seria de color amarillo que significa que el microorganismo fermenta glucosa, y lactosa. Si el medio cuenta tanto con superficie como con fondo de color rojo, indicaría que el inóculo no fermenta azúcares, algo característico de la Salmonella.

Resultados y conclusiones: 

En este caso, podríamos terminar nuestra hipótesis con la sospecha de E.coli, ya que el microorganismo fermenta glucosa y lactosa. Aun así, el ennegrecimiento del medio despista un poco y esto podría deberse a una alta concentración de bacterias o producción de ácido por un tiempo prolongado de incubación. Además hay un articulo que reafirma de el por qué esta bacteria se ve de esta forma en el Agar KIA.

CONCLUSIONES FINALES: Después de los resultados obtenidos la prueba podemos llegar a la conclusión de que se trata de una enfermedad causada por E. coli . Esta infección bacteriana provoca diarrea y fiebre que son los síntomas presentados por la paciente; y podría haber adquirido este microorganismo por una contaminación alimentaria.